fmo荧光减一对照(Fluorescence Minus One，FMO)是指实验设计里的所有荧光减去一个荧光后染色的细胞样本。
多色流式实验中，检测指标越多，越容易发生荧光溢漏，对照在任何实验中都是必不可少的，尤其在流式细胞术中，只有合理对照才可以将实验结果和背景区分，排除非特异性的效应，获得高质量的数据。
所以单一阳性对照已经很难满足其实验要求，只有对照设置的越充分，得到的实验结果才会越精准。
非特异性信号产生的原因：
比如常见的肿瘤细胞自发荧光，会造成背景信号干扰。
又如，单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和B细胞上，Fc受体均呈现高表达，在染色过程中抗体Fc端与细胞表面Fc受体的结合以及抗体与细胞的物理结合与粘附等，在这些细胞可能通过Fc结构域而不是抗原特异性Fab结构域与抗体发生结合，造成非特异性染色的发生。
除此外，样本中的死细胞不仅具有更强的自发荧光，而且更容易产生非特异性抗体的结合，造成假阳性。为了避免上述情况，在流式抗体染色前需要使用Fc受体阻断剂和鉴别死细胞的活性染料对Fc受体及死细胞造成的非特异性染色加以去除。
以上内容参考：百度百科--免疫荧光
